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Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es una tecnología en biología molecular utilizada para amplificar una única copia o unas pocas copias de un fragmento de ADN a lo largo de varias órdenes de magnitud, generando miles a millones de copias de una secuencia de ADN particular.
El método se basa en el ciclo térmico, que consiste en ciclos de calentamiento y enfriamiento repetidos de la reacción para la desnaturalización del ADN y la replicación enzimática del ADN. Los cebadores (fragmentos cortos de ADN) que contienen secuencias complementarias a la región objetivo junto con una polimerasa de ADN, de la cual el método toma su nombre, son componentes clave para permitir la amplificación selectiva y repetida.
A medida que avanza la PCR, el ADN generado se utiliza como plantilla para la replicación, poniendo en marcha una reacción en cadena en la que el ADN se amplifica de manera exponencial. La PCR se puede modificar ampliamente para realizar una amplia variedad de manipulaciones genéticas.
Pruebas basadas en la reacción en cadena de la polimerasa en R.E.D. Laboratories
Las PCRs disponibles se pueden realizar en sangre, líquidos corporales (líquido cefalorraquídeo, saliva, hisopos vaginales, etc.), biopsias (intestinales, cutáneas, etc.), garrapatas, etc.
R.E.D. Labs desarrollaron una variedad de ensayos basados en PCR (tanto PCRS convencional como qPCR en tiempo real) para respaldar las pruebas de infecciones crónicas. Todos los fragmentos amplificados están sujetos a secuenciación para confirmar la positividad real de la muestra (es decir, para evitar resultados falsos positivos).
Actualmente disponibles Pruebas de PCR para infecciones bacterianas iincluyen: Mycoplasma spp, Mycoplasma fermentans, Mycoplasma pneumoniae, Bartonella, Brucella, Coxiella, Babesia, Anaplasma, Ehrlichia, Chlamydias, Rickettsias, Midichloria mitochondrii, etc.
Actualmente disponibles Pruebas de PCR para infecciones virales incluyen: herpesvirus como HHV-6, HHV-7, HHV-8, parvovirus, EBV, citomegalovirus, virus del Nilo Occidental y virus Coxsackie.
Los científicos de R.E.D. Labs también desarrollaron una variedad de qPCRs en tiempo real para la cuantificación de ARNm de citoquinas y marcadores relacionados con la inmunidad, como elastasa, perforina, panel de citocinas Th1/Th2, panel de citocinas proinflamatorias, etc.
Las PCRs también se utilizan para pruebas de genotipado.
