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Enfoque en disfunciones gastrointestinales
R.E.D. Laboratories
Pruebas especializadas para aflicciones multifactoriales
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Quiénes somos
R.E.D. Laboratories es una empresa privada belga que desarrolla pruebas para pacientes con cuadros clínicos complejos, enfermedades inmunes crónicas y disfunciones intestinales.
Buscamos activamente el desarrollo de nuevas pruebas para proporcionar a los médicos herramientas actualizadas.
Cómo trabajamos
En R.E.D. Laboratories, desarrollamos continuamente nuevas pruebas de acuerdo a las necesidades específicas de los proveedores de atención médica.
Todos los beneficios generados se utilizan para la investigación y desarrollo de nuevos ensayos.
Participamos en varios grupos internacionales con el objetivo de avanzar en el conocimiento de los marcadores biológicos de las aflicciones multifactoriales. aflicciones multifactoriales that are not optimally supported by general health care systems.
Nuestra filosofía
Nos enfocamos en establecer pruebas que no están (o raramente están) disponibles en otros lugares.
La personalización del panel de pruebas conduce a una gestión más eficiente y rápida de los pacientes con cuadros clínicos complejos.
Los programas de desarrollo de ensayos en R.E.D. Laboratories se centran en trastornos que contribuyen al inicio y la patogénesis de enfermedades como el síndrome de fatiga crónica, el autismo, las infecciones crónicas o las enfermedades autoinmunes. síndrome de fatiga crónica, el autismo, las infecciones crónicas o las enfermedades autoinmunes.
Lo que ofrecemos
Cada vez hay más evidencia que sugiere que una combinación de factores (genéticos, infecciosos, ambientales, etc.) es importante en el desarrollo de disfunciones inmunes crónicas, el hallazgo cardinal en pacientes con autismo, infecciones crónicas y síndrome de fatiga crónica.
En muchos países, estas afecciones aún se consideran como psiquiátricas a pesar de la clara evidencia biomédica.
Para un mejor manejo de estas afecciones multifactoriales que sufren de falta de reconocimiento médico, ofrecemos PRUEBAS ESPECIALIZADAS centrado en 3 temas principales:
Trastornos inmunológicos,
disfunciones intestinales e
infecciones
Consulte nuestro sitio web, nuestros formularios de solicitud de pruebas y nuestro catálogo para obtener listas completas de pruebas y pruebas recién disponibles.
Disfunciones intestinales
Regulación de la función inmunológica en el intestino
El 70% de nuestras células inmunológicas residen en el intestino
El tejido linfoide asociado al intestino (GALT) se extiende a lo largo de la mucosa intestinal (placas de Peyer en el intestino delgado, folículos linfoides en el colon) y alberga el 70% de las células inmunológicas del cuerpo
Estas células inmunológicas interactúan permanentemente con microorganismos asociados a la mucosa (bacterias, virus, etc.)
Se mantiene un delicado equilibrio entre la tolerancia a los antígenos intestinales (regulación a la baja de la inflamación, etc.) y la defensa contra los patógenos (producción de defensinas, etc.)
El desequilibrio de la inmunidad intestinal afecta todo el cuerpo
La integridad de la barrera intestinal es esencial: el aumento de la permeabilidad de la mucosa provoca endotoxemia sistémica (inflamación crónica de bajo grado) y reacciones inmunes anormales a los antígenos intestinales.
Interacciones huésped/flora intestinal: la flora microbiana intestinal desempeña un papel importante en el mantenimiento de la salud del huésped, pero puede verse afectada por una función inmune anormal del huésped.
Establecimiento y composición de la flora intestinal
El tracto gastrointestinal humano está colonizado por 1014 microorganismos
Las citoquinas liberadas por Th1 son: IL-2, IL-12, INFɣ, INFa e INFb
La colonización comienza inmediatamente después del nacimiento
El establecimiento de poblaciones específicas dependerá de muchos factores (nacimiento normal o por cesárea, lactancia materna vs. lactancia con fórmula, condiciones de higiene durante los primeros meses de vida, uso temprano de antibióticos, genética, etc.). A los 1-2 años de edad, el ecosistema se estabiliza.
Diversidad extrema (de 500 a 1000 especies bacterianas diferentes)
Especificidad: cada individuo muestra un patrón único de diversidad microbiana.
Aparente estabilidad a lo largo de la vida, buena resiliencia, pero puede verse afectada por fármacos, infecciones, cambios en la dieta…
El microbioma contribuye al procesamiento y metabolización de los alimentos
digestión y absorción de nutrientes
metabolismo de los azúcares
síntesis de ácidos grasos de cadena corta (por ejemplo, síntesis de butirato por Faecalibacterium, Roseburia... es importante para la salud del colon... pero genera mucha energía, lo que puede llevar a la obesidad)
síntesis de aminoácidos y vitaminas (vitamina B12, vitamina B9, vitamina K)
desintoxicación de contaminantes y moléculas tóxicas presentes en los alimentos
regulación de la función inmunológica
Pruebas ofrecidas en R.E.D. Laboratories para disfunciones intestinales
En R.E.D. Labs, utilizamos las siguientes pruebas para investigar las disfunciones intestinales:
Pruebas basadas en sangre
sCD14 en suero
Prueba de deficiencia de lactasa
Cuantificación de D-lactato en suero
Cuantificación de amoníaco en suero
Pruebas basadas en heces
Prueba de ELISA de sIgA en muestras de heces
Prueba de ELISA de ZONULINA en muestras de heces
Prueba de ELISA de EDN / EPX en muestras de heces
Prueba de ELISA de beta-Defensin-2 en muestras de heces
Marcadores de inflamación en muestras de heces
Infecciones en muestras de heces
Prueba de MSA
Pruebas basadas en sangre para disfunciones intestinales
sCD14 en suero. sCD14 se expresa en monocitos/macrófagos y desempeña un papel crítico en el reconocimiento de componentes de la pared celular bacteriana (LPS). La parte extracelular de CD14 puede ser cortada y liberada en el plasma, donde inactivará el LPS circulante. Los niveles séricos solubles de CD14 están significativamente elevados en pacientes con permeabilidad intestinal aumentada, enfermedad inflamatoria intestinal y enfermedad de Crohn, pero también en pacientes con Brucelosis o enfermedad de Lyme.
Prueba de deficiencia de lactasa
Un polimorfismo en el gen que codifica la lactasa, una enzima responsable de la digestión de la lactosa (polimorfismo C/T-13910), en personas afectadas, la producción de la enzima disminuye durante o poco después de la infancia, lo que resulta en malabsorción de lactosa. Los azúcares de lactosa no digeridos afectan el desarrollo de la microflora intestinal, lo que lleva a la disbiosis.
D-lactato en suero
Es un producto del metabolismo bacteriano, que no es producido ni metabolizado por las células de mamíferos. Por lo general, los niveles elevados de D-lactato se deben a infecciones bacterianas o al síndrome de intestino corto en humanos. Debido a su metabolismo y excreción lenta, el alto D-lactato puede causar acidosis y encefalopatía.
Amoníaco en suero
El amoníaco se deriva de la acción enzimática bacteriana sobre los aminoácidos ingeridos. Se absorbe del tracto gastrointestinal y se entrega a través de la vena porta hacia el hígado, donde la mayor parte se convierte en urea. Niveles anormalmente altos de amoníaco pueden ser el resultado de cólicos o "hiperamonemia entérica" (combinación de producción bacteriana aumentada y aumento de la permeabilidad intestinal) que ocurre a pesar de una función hepática normal. La hiperamonemia es una condición metabólica caracterizada por niveles elevados de amoníaco en la sangre. La entrada aumentada de amoníaco al cerebro es una causa principal de trastornos neurológicos, trastornos metabólicos y algunas encefalopatías tóxicas.
Pruebas basadas en heces para disfunciones intestinales
Prueba de ELISA de sIgA en muestras de heces. La sIgA tiene la función clave de unirse a microorganismos invasores y toxinas y atraparlos en la capa de moco o dentro de las células epiteliales, inhibiendo así la motilidad microbiana, aglutinando los organismos y neutralizando sus exotoxinas, y luego ayudando a su eliminación inofensiva del cuerpo en el flujo fecal.
La concentración de sIgA nos proporciona información sobre la defensa inmunológica intestinal:
La falta de sIgA indica una actividad disminuida del sistema inmunológico intestinal.
Se muestra un nivel elevado de sIgA de la inflamación intestinal.
Prueba de ELISA de ZONULINA en muestras de heces
Zonulin es la "puerta de entrada" a las fugas. Zonulin abre los espacios entre las células del revestimiento intestinal. Cuando hay intestino permeable, los espacios entre las células se abren demasiado, lo que permite que moléculas de proteínas y bacterias más grandes ingresen al torrente sanguíneo, donde puede tener lugar una reacción inmunológica. A medida que aumenta el nivel de zonulina, el sello entre las células intestinales disminuye. La zonulina es el único modulador fisiológico de las uniones estrechas intercelulares descrito hasta el momento que participa en el tráfico de macromoléculas y, por tanto, en el equilibrio tolerancia/respuesta inmune.
Prueba de ELISA de beta-Defensin-2 en muestras de heces
Las defensinas ejercen un grado variable de actividad antimicrobiana contra bacterias, hongos y algunos virus con envoltura. La expresión de ß-defensinas es inducida por citocinas proinflamatorias y también a través de microorganismos (p. ej. E. coli, H. pylori o P. aeruginosa) y por microorganismos probióticos. Por ejemplo, se puede observar una deficiencia de ß-defensina-2 en la mucosa intestinal de pacientes con enfermedad de Crohn. Por lo tanto, el sistema de defensa de la mucosa está restringido y permite una mayor invasión de bacterias, lo que podría conducir a una infección típica de la enfermedad de Crohn. pacientes con enfermedades. Resultados recientes implican que la ß-defensina-2 se sobreexpresa en la inflamación intestinal activa, especialmente en la colitis ulcerosa.
Prueba de ELISA de EDN / EPX en muestras de heces
La acumulación de EDN en el intestino se asocia con inflamación y daño tisular. La EDN fecal se considera la mejor de las proteínas granulares citotóxicas para la evaluación de la inflamación intestinal. Los niveles elevados de EDN fecal están relacionados con múltiples afecciones inflamatorias, como alergia/sensibilidad alimentaria, infecciones patógenas (C. difficile y Pylori), síndrome del intestino irritable y trastornos gastrointestinales eosinofílicos.
Marcadores de inflamación en muestras de heces
Hemoglobina: descargada con las heces en enfermedades hemorrágicas gastrointestinales.
Transferrina: un componente derivado de la sangre; un buen marcador de hemorragia gastrointestinal
Calprotectina: una proteína citosólica de neutrófilos con propiedades antimicrobianas, que está presente en concentraciones elevadas en las heces durante la inflamación intestinal.
Lactoferrina: componente primario de la respuesta inflamatoria aguda liberada por los leucocitos fecales; puede servir como marcador de inflamación en el intestino
Consecuencias del intestino permeable: activación crónica (inflamación) del sistema inmunológico
Lipopolisacárido (LPS): un compuesto bacteriano que puede llegar fácilmente a la sangre.
Presente en el torrente sanguíneo, el LPS inducirá una fuerte respuesta proinflamatoria en monocitos y macrófagos, implicando el reconocimiento por un receptor (receptor de tipo Toll-4) y la posterior secreción de citocinas como IL-1, IL-6, TNF-alfa.
El LPS también induce la producción mediada por NK-kB de óxido nítrico. Debido a que el NO está incrementado, la función NK está inhibida y a menudo se observan infecciones oportunistas como infecciones por micoplasma.
Los herpesvirus, que tienden a reactivarse en un contexto de activación inmunológica, también se detectarán con frecuencia.
En R.E.D. Labs, se evalúan estos problemas mediante pruebas de
expresión de sCD14
expresión de citocinas
expresión de PGE2
detección de virus en sangre y biopsias intestinales
infecciones por micoplasma
estrés oxidativo
Pruebas ofrecidas en R.E.D. Laboratories para disfunciones intestinales
Pruebas basadas en heces
Evaluaciones de infecciones en muestras de heces
Ensayo de metagenómica en muestras de heces (MSA)
Análisis de la microbiota intestinal: de los cultivos a la secuenciación a gran escala:
Hasta hace poco, la investigación sobre la composición de la microbiota se basaba casi exclusivamente en cultivos; el 40 al 80% de las bacterias intestinales no se pueden cultivar.
La identificación de colonias puede ser difícil
Las bacterias deben estar vivas: los estudios de anaerobios son muy difíciles, se produce una gran pérdida durante la recolección y el procesamiento de las muestras
El enfoque de cultivo puede abordar solo una pequeña fracción de todas las especies bacterianas (10%?)
Se pensaba que E. coli era una especie dominante, pero es un miembro menor...
Los científicos de R.E.D. Labs han desarrollado y validado un nuevo procedimiento para analizar las poblaciones bacterianas en una muestra de heces: el ensayo MSA
Nueva técnica molecular que implica la secuenciación de regiones específicas del ADN bacteriano (metagenómica)
Se puede realizar en organismos muertos (la exposición al oxígeno o la congelación no son un problema)
Identificación de cada bacteria mediante comparación de secuencias con bases de datos públicas: extremadamente precisa, no subjetiva
La tecnología de alto rendimiento permite la identificación de decenas o incluso cientos de miles de organismos en una sola muestra
Se extrajo ADN bacteriano de las muestras de heces, se realizó una amplificación por PCR de las regiones del gen ARNr 16S, y se secuenciaron los amplicones de PCR. Las bacterias se clasificaron por filo, familia y género
Informe de plantilla de ensayo MSA
Informe de plantilla de ensayo MSA
Los signos y síntomas relacionados con el tracto gastrointestinal y el hígado pueden proporcionar pistas importantes para el diagnóstico de diversas enfermedades transmitidas por garrapatas
DE: MANIFESTACIONES GASTROINTESTINALES Y HEPÁTICAS DE LAS ENFERMEDADES TRANSMITIDAS POR GARRAPATAS EN ESTADOS UNIDOS SYED ALI ZAIDI Y CAROL SINGER, CLIN INFECT DIS. 2002;34(9):1206-1212. DOI:10.1086/339871
Enfermedad de Lyme y trastornos gastrointestinales
Los pacientes con Lyme y enfermedades transmitidas por garrapatas pueden presentar principalmente problemas gastrointestinales
Conferencia de la ILADS 2015, Farshid Rahbar: Estos pacientes pueden tener síntomas gastrointestinales complejos o persistentes que involucran el tracto gastrointestinal superior, medio o inferior y ya han sido tratados por problemas gastrointestinales
Hinchazón/Gases: en el 76% de los pacientes
Dolor abdominal: en el 48% de los pacientes
Estreñimiento: en el 42% de los pacientes
Intolerancia alimentaria: en el 42% de los pacientes
Movimientos intestinales irregulares: en el 37% de los pacientes
El número de pacientes que presentan tales síntomas probablemente esté alcanzando proporciones epidémicas.
Es necesario incluir pruebas para problemas gastrointestinales
Pruebas útiles para investigar problemas intestinales:
Pruebas BASADAS EN SANGRE: Amoníaco en suero, Prueba de deficiencia de lactasa, D-lactato, sCD14
Pruebas BASADAS EN BIOPSIA: Detección basada en PCR de infecciones virales y bacterianas
Pruebas BASADAS EN HECES:
Inflamación intestinal: sIgA, Beta-2 Defensina, EPX / EDN, Marcadores de inflamación en muestras de heces
Infecciones intestinales: pruebas de antígenos por inmunocromatografía para infecciones intestinales
Intestino permeable: Prueba de ELISA de ZONULINA en muestras de heces
Disebiosis: Ensayo MSA (prueba de metagenómica en muestras de heces)
Consecuencias de las enfermedades transmitidas por garrapatas
Aunque el TEA afecta principalmente al cerebro, en los últimos años se han vuelto evidentes las conexiones con otros sistemas, en particular los problemas gastrointestinales (GI) parecen ocurrir con más frecuencia en individuos con TEA que en el resto de la población.
Los problemas gastrointestinales asociados con el TEA podrían deberse a dos factores: en primer lugar, una activación inmune inapropiada que causa inflamación del tracto; y en segundo lugar, diferencias en los tipos de bacterias intestinales presentes.
Eje intestino-cerebro en el autismo
Disfunciones intestinales en el autismo
La flora intestinal y el estado gastrointestinal en niños con autismo se correlacionan con la gravedad del autismo
de las bacterias beneficiosas investigadas, los niños con autismo tenían niveles mucho más bajos de Bifidobacterium (-45%), niveles ligeramente más bajos de Enterococcus (-16%), y niveles mucho más altos de Lactobacillus (+100%).
Finegold et al. (Anaerobe 2010) informó que en las heces de los niños control, Firmicutes representaba el 63.6% de la flora total, pero solo el 38-39% de la flora en las heces de los niños con autismo. Bacteroidetes representaba el 30% de la flora en los controles y el 51% en la flora de las heces de los niños con autismo. Actinobacteria representaba el 1.8% de la flora de las heces de los controles y entre el 0.4 y el 0.7% de la flora de las heces de los niños con autismo. Proteobacteria representaba el 5% de la flora de los niños control y entre el 2.3 y el 3.1% de la flora de las heces de los niños con autismo. En resumen, la flora fecal de los niños con autismo fue estadísticamente significativamente diferente de la flora fecal de los niños sanos.
R.E.D. Laboratories ofrece pruebas especializadas para analizar en profundidad la microbiota intestinal: ensayo MSA
Niño con TEA MSA
Niño con TEA MSA
Prevotella: fuertes productores de sulfuro de hidrógeno (H2S). En exceso, el H2S actúa como un veneno mitocondrial y una potente neurotoxina. Puede inhibir directamente las enzimas implicadas en la producción celular de energía. El H2S también interfiere con el transporte de oxígeno al bloquear la hemoglobina en los glóbulos rojos. Finalmente, el H2S reduce el pH intestinal impidiendo el crecimiento de muchas bacterias beneficiosas.
Niño con TEA MSA
1ra visita a abril de 2017:
Alto en Bacteroides y Prevotella
2.a visita en diciembre de 2017: Bacteroides aún elevados pero Prevotella normalizada
3ra visita Diciembre 2018: Normalizados tanto Bacteroides como Prevotella
Adulto TEA 28 años Estreptococo:
interacción con la parte del cerebro conocida como ganglios basales. Se cree que esto causa la aparición repentina de tics o comportamientos obsesivo-compulsivos.
Inflamación intestinal en el autismo
Autismo e inflamación gastrointestinal
Varios informes han revelado una alta prevalencia de síntomas gastrointestinales, inflamación y disfunción en niños con autismo (revisado por Horvath y Perman, Curr Gastroenterol 2002).
Se encontraron grados leves a moderados de inflamación tanto en el tracto intestinal superior como en el inferior. En los niños con TEA, la presencia de disfunción intestinal a menudo se asocia con un aumento de la irritabilidad, los berrinches, el comportamiento agresivo y los trastornos del sueño (revisado por Critchfield et al., Gastroenterol Res 2011).
Intestino permeable en niños con autismo
Subgrupos de trastornos relacionados con el síndrome de fatiga crónica: disfunciones intestinales
Evidencia de disfunción gastrointestinal en el síndrome de fatiga crónica (SFC)
Síntomas gastrointestinales en pacientes
Más del 90% de los pacientes con SFC presentarán síntomas de SII durante su vida
la coexistencia de SFC y SII se asocia con niveles aumentados de citocinas inflamatorias [Aaron et al., Arch Internal Med 2000; Scully et al., Am J Gastroenterol 2010]
Evidencia endoscópica
El examen endoscópico del duodeno o el estómago revela casi sistemáticamente la existencia de áreas inflamadas de la mucosa
Marcadores de inflamación en las heces
Subgrupos de trastornos relacionados con el síndrome de fatiga crónica: disfunciones intestinales
Disbiosis en el síndrome de fatiga crónica
Un trastorno frecuente de la función intestinal es la disbiosis, es decir, el crecimiento excesivo de bacterias patógenas en el intestino.
Varios estudios publicados sugieren que el SFC está asociado con la disbiosis
Las pruebas basadas en cultivo revelaron niveles aumentados de Streptococcus y Enterococcus spp. en muestras fecales de pacientes con EM/SFC [Sheedy et al., In Vivo 2009]
La suplementación con probióticos ( casei en un estudio, L. paracasei + L. acidophilus + B. lactis en otro estudio) resultó en una mejora de los síntomas emocionales y las funciones neurocognitivas [Rao et al., Gut Pathog 2009; Sullivan et al., Nutr J 2009]
Utilizamos las siguientes pruebas para investigar disfunciones intestinales:
sCD14
Prueba de deficiencia de lactasa
Pruebas de ELISA de sIgA en muestras de heces
Pruebas de ELISA de Zonulina en muestras de heces
Pruebas de ELISA de beta-2 defensina en muestras de heces
Pruebas de ELISA de EPX/EDN en muestras de heces
Marcadores de inflamación en muestras de heces
Prueba MSA
Detección basada en PCR de infecciones virales
Infecciones virales: Varios virus se han asociado con el SFC
Herpesvirus humano 6 y 7 [Chapenko et al., J Clin Virol 2006]
Enterovirus [Chia et al., J Clin Pathol 2010]
Parvovirus B19 [Kerr et al., J Gen Virol 2010]
Bornavirus [Nakaya et al., FEBS Lett 1996]
Virus de Epstein-Barr [Lerner et al., In Vivo 2004]
No específico para el SFC; ninguno de estos virus se encuentra en todos los pacientes con SFC
Las infecciones virales persistentes pueden afectar la inmunidad intestinal
HHV-6 es inmunosupresor, causa disminución de las células CD4, regulación a la baja de CD3 en las células T infectadas, alteración de la expresión de citocinas (TNF-alfa, IL-1b, IL-10, IL-12). La infección por parvovirus se asocia con una respuesta de IFNg alterada.
Consecuencias en la salud intestinal
La inmunosupresión puede favorecer el desarrollo de otros virus o patógenos; la alteración de la inmunidad intestinal también puede afectar la flora intestinal
Infecciones virales: búsqueda de virus en la mucosa intestinal: razonamiento y enfoque experimental
La mucosa gastrointestinal es un reservorio conocido de varios virus
HHV-6, HHV-7, CMV se encuentran en biopsias intestinales de pacientes con VIH y receptores de trasplantes;
EBV se encuentra en la mucosa gástrica, asociado con gastritis y cáncer gástrico; infecciones crónicas
por enterovirus se han encontrado en el estómago de pacientes con SFC
Se ha realizado un estudio en RED Laboratories para investigar la presencia de infecciones virales específicas en el tracto gastrointestinal de pacientes con SFC
Enfoque experimental
Determinación de las cargas virales de HHV-6, EBV y parvovirus B19 en biopsias gástricas e intestinales de pacientes con SFC y controles no SFC, mediante PCR cuantitativa en tiempo real. 48 pacientes, 35 controles.
PUBLICADO EN: IN VIVO 2009; MAR-APR;23(2):209-13. DETECTION OF HERPESVIRUSES AND PARVOVIRUS B19 IN GASTRIC AND INTESTINAL MUCOSA OF CHRONIC FATIGUE SYNDROME PATIENTS. BY FRÉMONT M, METZGER K, RADY H, HULSTAERT J, DE MEIRLEIR K.
Infecciones virales: Cargas virales de HHV-6 en biopsias positivas
Varias cargas altas en la mucosa gástrica de los pacientes con SFC
Cargas más altas en el estómago que en el duodeno.
Infecciones virales: Parvovirus B19 en biopsias de estómago y duodeno
Frémont et al., In vivo 2009
Higher frequency of Parvovirus B19 in both gastric and duodenal mucosa of patients compared to controls
Preguntas y contactos
Referencias: FT-Mijatovic-red-labs-presentation-gastro-2021
Material disponible en el sitio web ( redlabs.com)
Consulte regularmente nuestro sitio web (www.redlabs.com) para obtener las actualizaciones
Preguntas y contacto:
Consultas generales, logística: Envíe un correo electrónico a info@redlabs.be
Preguntas científicas: Envíe un correo electrónico a tmijatovic@redlabs.be
